無論是干細(xì)胞、生殖細(xì)胞還是其他生物樣本,每個(gè)研究人員都有自己喜歡的儲(chǔ)存方法。但哪一個(gè)最好?
氮?dú)庹羝鋬鰴C(jī)和機(jī)械冷凍機(jī)有什么區(qū)別?
機(jī)械冷凍機(jī)通常設(shè)計(jì)為直立式,便于接近,并由發(fā)動(dòng)機(jī)或壓縮機(jī)提供動(dòng)力。通常,這種類型的冷凍機(jī)可能使用乙烷(R170)或丙烷(R290)等制冷劑。雖然它們可以在較低的溫度下短時(shí)間運(yùn)行,但機(jī)械冷凍機(jī)通常保持在-80°C左右。
同時(shí),氮蒸氣冷凍柜的設(shè)計(jì)更接近液氮冷凍柜,液氮冷凍柜具有圓形輪廓,以允許進(jìn)入。樣品架放置在冷凍柜內(nèi)的轉(zhuǎn)盤上。氮蒸汽冷凍機(jī)的不同之處在于,它結(jié)合了一個(gè)熱交換系統(tǒng),該系統(tǒng)使用液氮的汽化能量作為冷卻劑。
使用這種將樣品儲(chǔ)存在氮?dú)庹羝皇且后w中的方法,可以在-20至-150°C之間儲(chǔ)存樣品,從而在溫度上具有更大的靈活性。只要有LN?供應(yīng),設(shè)定溫度幾乎可以無限期保持。
樣品很容易通過冷凍柜頂部的蓋子進(jìn)入,里面的轉(zhuǎn)盤可以進(jìn)入相關(guān)的樣品架。機(jī)械冷凍機(jī)通常是研究人員的首選,盡管他們需要定期、頻繁地接觸樣本。
機(jī)械冷凍機(jī)的缺點(diǎn)
盡管機(jī)械冷凍機(jī)提供了樣本檢索的好處,但它們也有許多缺點(diǎn)。首先,機(jī)械冷凍機(jī)的溫度是有限的。即使在-80°C的溫度下操作基于壓縮機(jī)的冷凍機(jī)也需要大量的能量,并可能對機(jī)組部件造成壓力。這會(huì)對環(huán)境產(chǎn)生明顯的影響,甚至在您考慮是否需要暖通空調(diào)系統(tǒng)來去除冰箱產(chǎn)生的多余熱量之前。
機(jī)械冷凍機(jī)的另一個(gè)缺點(diǎn)是熱點(diǎn),這是整個(gè)冷凍機(jī)溫度變化較大的地方,在某些情況下,溫差可達(dá)30°C。相比之下,MVE Vario等氮蒸汽冷凍機(jī)可以保持<5°C的溫度變化。
機(jī)械冷凍機(jī)最令人擔(dān)憂的缺點(diǎn),也是讓研究人員夜不能寐的缺點(diǎn),是它們?nèi)狈θ哂唷H绻娫幢磺袛?,或者冷凍柜發(fā)生故障,樣本很快就會(huì)變得不可行。有時(shí),這可能會(huì)在沒有警告的情況下發(fā)生。
2012年,哈佛大學(xué)腦組織資源中心的一臺(tái)冰箱發(fā)生故障,損壞了世界上最大的自閉癥腦樣本庫的三分之一。盡管外部恒溫器的讀數(shù)為-80°C,但內(nèi)部的溫度更接近家用冰箱的溫度。只有當(dāng)研究人員手動(dòng)調(diào)查時(shí),才發(fā)現(xiàn)了這一故障。
約翰斯·霍普金斯大學(xué)神經(jīng)病學(xué)副教授、神經(jīng)病理學(xué)家卡洛斯·帕爾多教授表示,這一失敗使自閉癥研究倒退了十年。
氮蒸汽冷凍機(jī)更可靠嗎?
氮蒸汽冷凍機(jī)的故障率要低得多,因?yàn)樗鼈兊臋C(jī)械部件較少。雖然它們確實(shí)需要控制面板的小型電源,但這可以在備用電池上運(yùn)行,從而確保內(nèi)部樣品的安全。假設(shè)冷凍柜持續(xù)供應(yīng)液氮,它將繼續(xù)運(yùn)行并保持樣品冷凍。
氮?dú)庹羝鋬鰴C(jī)可以由實(shí)驗(yàn)室外儲(chǔ)存的儲(chǔ)罐供應(yīng),儲(chǔ)罐可以根據(jù)需要定期輸送液氮。
簡單地打開基于壓縮機(jī)的冷凍柜的門就可以改變內(nèi)部的溫度。這對于非常脆弱的樣品來說可能是危險(xiǎn)的。如果電源被切斷,那么樣品可能會(huì)在幾個(gè)小時(shí)內(nèi)損壞。相比之下,現(xiàn)代氮蒸氣冷凍機(jī)可以長時(shí)間保持其非常低的溫度。例如,MVE Variō?的隔熱性能非常好,在-80°C下運(yùn)行時(shí),即使沒有液氮供應(yīng),溫度也需要四天才能升至-60°C。
如果確實(shí)發(fā)生故障,氮?dú)庹羝鋬鰴C(jī)的維修通常是快速、簡單和廉價(jià)的,因?yàn)闆]有昂貴的壓縮機(jī)或電機(jī)需要更換。
熱門話題
溫度是兩種儲(chǔ)存模式支持者的主要分界點(diǎn)。如上所述,壓縮機(jī)冷凍機(jī)通常在-80°C左右運(yùn)行。在較低的溫度下運(yùn)行它們是可能的,但這會(huì)給電機(jī)帶來額外的壓力,并經(jīng)常導(dǎo)致故障。
MVE Variō?冷凍柜等氮?dú)庹羝鸘LT冷凍柜可以在低至-150°C的溫度下舒適地儲(chǔ)存樣品。這遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了水的玻璃化轉(zhuǎn)變點(diǎn)(-135°C),低于該點(diǎn),幾乎所有的生物功能都會(huì)停止。許多人認(rèn)為這是確保樣品不會(huì)隨時(shí)間降解的唯一方法。
一些存儲(chǔ)庫將利用這兩種模式對其樣本的好處。過快冷凍樣品會(huì)損壞細(xì)胞膜,在某些情況下,可以使用壓縮機(jī)冷凍機(jī)在將樣品長期儲(chǔ)存之前逐漸降低樣品的溫度。這在液氮冷凍機(jī)中通常是不可能的,但氮蒸氣ULT冷凍機(jī)具有改變溫度的能力。使樣品能夠緩慢降低到所需的溫度,在那里它們可以長期儲(chǔ)存或很容易地轉(zhuǎn)移到傳統(tǒng)的液氮冷凍柜中。
判決書
兩種樣品儲(chǔ)存模式都有其支持者和反對者,每種模式都有優(yōu)缺點(diǎn),具體取決于可訪問性、可靠性和溫度等多個(gè)因素。
可以肯定的是,對于重要樣本的中長期儲(chǔ)存,氮蒸氣冷凍機(jī)比機(jī)械或液氮冷凍機(jī)提供了更大的靈活性,同時(shí)也提供了傳統(tǒng)液氮裝置的可靠性。
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